Bimolecular Fluorescence Complementation (BiFC) ትንታኔ በቀጥታ ሕዋስ ምስል ወይም ቋሚ ህዋሶችን በመጠቀም የፕሮቲን-ፕሮቲን መስተጋብርን በቀጥታ ለማየት የሚጠቅም ዘዴ ነው። … BiFC መጀመሪያ የተገለፀው በHu et al ነው።
የቢሞለኩላር ፍሎረሰንት ማሟያ እንዴት ይሰራል?
የቢኤፍሲ የስራ መርሆ በፍሎረሰንት ኮምፕሌክስ እድገት ላይ የተመሰረተ ነው፣ይህም የፍሎረሰንት ፕሮቲን ሁለት ክፍልፋዮች በማገናኘት ምክንያት በፕሮቲን-ፕሮቲን በስብርባሪዎች ውስጥ በሚፈጠር መስተጋብር ምክንያት በቅርበት ሲሆኑ፣ ማለትም። ፣ በBiFC ውስጥ ፣ ፍሎሮፎር ወደ አሚኖ እና የካርቦክሳይል ተርሚናል ጫፎች ይከፈላል ።
የBiFC ሙከራ ምንድነው?
Bimolecular fluorescence complementation (BiFC) assay በህያዋን ህዋሶች ውስጥ ያሉ የፕሮቲን ግንኙነቶችን ቀላል እና ቀጥተኛ እይታን ያስችላል(45)።የBFC አካሄድ ሁለት ፕሮቲኖች ከፍሎረሰንት ካልሆኑ የፍሎረሰንት ፕሮቲን ቁርጥራጮች ጋር ሲዋሃዱ የፍሎረሰንት ኮምፕሌክስን በመፍጠር ላይ የተመሰረተ ነው (ምስል
ለምንድነው የBiFC ሙከራ የሚደረገው?
የBiFC ሀሳብ ከፍላጎትዎ ፕሮቲኖች ጋር የተዋሃዱ የጂኤፍፒ ግማሾችን ለመግለጽPOIs መስተጋብር ከተፈጠረ፣ የሚሰራ GFP ለማግኘት ሁለቱንም ግማሾችን አንድ ላይ ማምጣት ይችላሉ። ስለዚህ በሕዋሱ ውስጥ የተገለጸው የጂኤፍፒ ግማሹ ካለ፣ የጂኤፍፒ ፀረ እንግዳ አካላት ሊያገኘው መቻሉ አያስደንቀኝም።
BiFC ሊቀለበስ ይችላል?
የBiFC ኮምፕሌክስ የማይቀለበስበት ሁኔታ በደንብ ተመዝግቧል (10)፣ እና ሁሉም ባይሆን አብዛኞቹ የፍሎረሰንት ፕሮቲን- የተመሰረቱ የBiFC ስርዓቶች የማይመለሱ (8, 33፣ 43፣ 48–51)።
